分析紫外可見分光光度計的幾個應用
發布時間:2021-12-29 點擊次數:169次
紫外可見分光光度計的運用十分廣泛。它能用于無機、有機化合物的定量分析及配合物的組成和穩定常數的測定,還能用于有機化合物的鑒定、結構分析及同分異構體的鑒定。
1、光度測量
在食品生產中為了保證有顏色的飲料(如可樂、果汁及茶飲料)產品的顏色一致,可以在可見光區用紫外可見分光光度計來測定其吸光度值,使色差符合產品要求。在發酵業中也可通過測定吸光度值來確定產品的發酵完成程度。對于一些成分比較單一的產品也可通過測定吸光度值來確定產品合格與否。比如,判定營養增強劑維生素的質量就可以在400nm下測定其吸光度值,當其值不超過0.020時,即可確定為合格品。
2、成分的定性分析
物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波長的光能量,相應發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子原子和不同的分子空間結構,其吸收光熊量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特性波長處的Zda吸收峰(峰值)和波形圖來判斷某種物質是否存在。
在食品生產中會使用一些食品添加劑,為了確定食品添加劑的質量,可以用紫外可見分光光度計對其進行光譜掃描。例如,對食品中涉及的一些復合甜味劑、復合防腐劑和復合鮮味劑等就可以用紫外可見分光光度計進行一個全面掃描以排除違禁添加劑的使用。另外,此方法還可以在物質結構分析方面作為紅外光譜(IR)、核磁共振((NMR)、質譜(MS)等方法的輔助手段。
3、成分的定量分析
對于食品衛生安全檢測中一些含量需要嚴格控制的成分項目可以用紫外可見分光光度計來準確檢測。食品中常用紫外可見分光光度計測定。
4、DNA/蛋白分析
DNA/蛋白質為生物大分子,所產生的紫外光吸收往往是其分子內的小基團所引起的,例如嘌呤堿、嘧啶堿、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和肽鍵等。嘌呤堿、嘧啶堿以及由它們參與組成的核昔、核苷酸及核酸對紫外光有強烈的吸收,在吸收波長260nm處有Zda吸收值。
在蛋白質分子中,酪氨酸(TYR)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸((Trp)殘基的苯環含有共扼雙鍵,該共扼雙鍵對紫外光有吸收(其中Zda吸收Tyr在吸收波長274nm;Phe在吸收波長257nm;Trp在吸收波長280nm),從而導致蛋白質對紫外光有吸收。肽鍵對紫外光的Zda吸收在吸收波長238nm。紫外可見分光光度計利用這個特性可以準確、可靠地測定乳制品中蛋白質含量。